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細胞爬片的固定的方法有哪些?
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一   將蓋玻片從24孔板中取出后,用PBS沖洗3次,再放入丙酮中固定5分鐘,室溫下涼干即可將其貼在載玻片上,-80度保存備用!注意,丙酮很容易揮發,為節約資源,最好在密閉容器中固定!
 

1.免疫組化的爬片是用冷丙酮固定15-20分,室溫涼干后,-20度保存或直接做。
 
2.TUNEL和DAPI染色,均用4%的多聚甲醛固定20-30分鐘。我做TUNEL時還用冷甲醇固定過,因為多聚甲醛可以自發熒光,為了避免假陽性。
 

1 免疫組化的爬片是用PBS沖洗3次,冷丙酮固定,這個大家都差不多,偶也做過。
 
2 我們這里也用4度甲醇:丙酮1:1的比例,固定十分鐘,效果很好,我屢試不爽哦。
 
3 對于抗原表達在細胞膜的爬片,最好用溫和一點的固定劑,如:多聚甲醛,效果更好一些!對于貼壁不牢的片子,最好用丙酮固定,多聚甲醛有時會在固定時細胞整片漂起。要是不用蓋玻片直接在六孔板里做的話,用丙酮很容易花板,這一點也要注意。

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